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近日，安徽醫(yī)科大學(xué)徐亞運(yùn)、柳文強(qiáng)為共同第一作者，陳飛虎教授為唯一通訊作者，在《INT J BIOL MACROMOL》（簡(jiǎn)稱IJBM)期刊發(fā)表題為“METTL3 increases ferroptosis resistance to facilitate the tumor-like features of rheumatoid arthritis synovial fibroblasts through enhancing SLC7A11 mRNA stability in an m6A-IGF2BP2-dependent manner”的科研成果。研究聚焦于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis, RA）滑膜成纖維細(xì)胞（Synovial Fibroblasts, SFs）的腫瘤樣特性（tumor-like characteristics），探討了N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine, m6A）修飾在RA發(fā)病機(jī)制中的作用，特別是METTL3通過m6A修飾增強(qiáng)SLC7A11 mRNA穩(wěn)定性，進(jìn)而影響RA滑膜成纖維細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力的分子機(jī)制。

標(biāo)題：METTL3 increases ferroptosis resistance to facilitate the tumor-like features of rheumatoid arthritis synovial fibroblasts through enhancing SLC7A11 mRNA stability in an m6A-IGF2BP2-dependent manner（METTL3通過m6A-IGF2BP2依賴性方式增強(qiáng)SLC7A11 mRNA穩(wěn)定性，提高鐵死亡抗性，從而促進(jìn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞的腫瘤樣特性）

發(fā)表時(shí)間：2025年7月5日

發(fā)表期刊：INT J BIOL MACROMOL

影響因子：IF8.5/Q2

技術(shù)平臺(tái)：MeRIP-seq、RNA-seq（易基因金牌技術(shù)）

DOI:10.1016/j.ijbiomac.2025.145698

 激活的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞（RASFs）表現(xiàn)出腫瘤樣特性，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）的關(guān)節(jié)破壞中起著重要作用。m6A作為mRNA上的重要修飾，參與多種生物過程，然而其在RA發(fā)病機(jī)制中的具體作用尚未完全明確。本研究旨在探討m6A甲基化對(duì)RASFs增殖、遷移和侵襲的作用及其潛在機(jī)制。研究結(jié)果揭示RA患者滑膜和滑膜成纖維細(xì)胞中METTL3表達(dá)上調(diào)。敲低METTL3可減少RASFs增殖、遷移和侵襲。具體而言，METTL3介導(dǎo)SLC7A11 mRNA的m6A修飾，通過與胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA結(jié)合蛋白2（IGF2BP2）互作以增強(qiáng)其穩(wěn)定性。此外，METTL3敲低加速RASFs中erastin誘導(dǎo)的鐵死亡，并進(jìn)一步抑制RASFs腫瘤樣特性。通過在膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（Collagen-Induced Arthritis, CIA）小鼠模型的關(guān)節(jié)內(nèi)注射攜帶shMETTL3的慢病毒實(shí)驗(yàn)顯示出關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重程度減輕和抑制滑膜成纖維細(xì)胞侵襲行為。總之，本研究結(jié)果表明，METTL3介導(dǎo)的m6A修飾在RA滑膜增生和侵襲的發(fā)病機(jī)制中起著關(guān)鍵作用。靶向METTL3治療干預(yù)可能為RA的治療提供一種新方法。

示意圖：METTL3介導(dǎo)的SLC7A11 m6A修飾參與RASFs增殖、遷移和侵襲

 

易小結(jié)

本研究通過MeRIP-seq和RNA-seq等組學(xué)技術(shù)，揭示了METTL3在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）滑膜成纖維細(xì)胞中的關(guān)鍵作用。表觀組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)的整合研究不僅揭示了RA的分子機(jī)制，還為未來類似研究提供了新的思路和方法。

易基因提供的表觀基因組技術(shù)，如MeRIP-seq，已經(jīng)在多種疾病研究中得到應(yīng)用，包括癌癥、心血管疾病和自身免疫性疾病，為深入理解疾病機(jī)制和開發(fā)新的治療策略提供了重要支持，在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)了廣泛的應(yīng)用前景。易基因提供的表觀基因組學(xué)技術(shù)，不僅為科研人員提供了全面的解決方案，還推動(dòng)了表觀遺傳學(xué)研究的前沿發(fā)展。

結(jié)果圖形

（1）RA患者滑膜和滑膜成纖維細(xì)胞中m6A水平及m6A修飾相關(guān)蛋白的表達(dá)

在RA患者的滑膜組織中，m6A修飾水平顯著高于對(duì)照組（圖1A）。與關(guān)節(jié)創(chuàng)傷患者相比，RA患者的滑膜中METTL3蛋白水平顯著升高（圖1B-C）。在膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（CIA）小鼠模型中，研究人員也觀察到滑膜組織中METTL3蛋白水平的上調(diào)（圖1D-E）。

為全面了解METTL3在RA中的作用，研究人員還比較了RA患者滑膜成纖維細(xì)胞（RASFs）和正常滑膜成纖維細(xì)胞（NSFs）中METTL3的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，無論是mRNA水平還是蛋白水平，METTL3在RASFs中的表達(dá)均顯著高于NSFs（圖1F-H）。此外，RA患者的滑膜中METTL3蛋白水平與紅細(xì)胞沉降率（ESR）和C反應(yīng)蛋白（CRP）水平呈正相關(guān)（圖1I-J）。這些結(jié)果表明，METTL3在RA的發(fā)病機(jī)制中可能存在關(guān)鍵作用。

圖1：RA患者滑膜和SFs中METTL3表達(dá)增加。

(A)    采用點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RA患者和關(guān)節(jié)創(chuàng)傷患者滑膜中m6A的水平。

(B-C) 通過免疫組化分析RA患者和健康對(duì)照者FLSs中m6A甲基化相關(guān)酶的表達(dá)。

(D-E) 通過免疫組化分析CIA小鼠和對(duì)照小鼠滑膜中METTL3的表達(dá)。

(F-H) 通過(F)RT-qPCR和(G和H)免疫熒光分析RASF和NSF中METTL3的表達(dá)。

(I)   分析RA患者滑膜中METTL3與ESR的相關(guān)性。

(J)  分析RA患者滑膜中METTL3與CRP的相關(guān)性。

 

（2）METTL3敲低抑制RASFs的增殖、遷移和侵襲

通過siRNA技術(shù)敲低METTL3后，RASFs的增殖能力顯著降低，如CCK-8和EdU實(shí)驗(yàn)所示（圖2A-C）。此外，METTL3敲低還抑制RASFs的遷移和侵襲能力，通過Transwell實(shí)驗(yàn)和創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證（圖2D-H）。這些結(jié)果表明，METTL3在RASFs的腫瘤樣特性中發(fā)揮重要作用。

圖2：METTL3敲低抑制RASFs的增殖、遷移和侵襲。

（A-C）CCK-8和EdU實(shí)驗(yàn)結(jié)果，顯示METTL3敲低對(duì)RASFs增殖的作用。

（D-F）Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果，顯示METTL3敲低對(duì)RASFs遷移和侵襲的作用。

（G-H）傷口愈合實(shí)驗(yàn)結(jié)果，顯示METTL3敲低對(duì)RASFs遷移能力的作用。

 

結(jié)論和啟示

本研究通過m6A-seq和RNA-seq技術(shù)，揭示了METTL3通過m6A修飾調(diào)控SLC7A11 mRNA穩(wěn)定性，進(jìn)而影響RASFs的腫瘤樣特性和鐵死亡的分子機(jī)制。這些發(fā)現(xiàn)為RA的治療提供了新的靶點(diǎn)，特別是通過靶向METTL3或其下游靶點(diǎn)SLC7A11和IGF2BP2，可能成為治療RA的新策略。此外，本研究還強(qiáng)調(diào)了m6A修飾在自身免疫性疾病中的重要作用，為未來類似研究提供了新的思路和方法。

MeRIP-seq在本研究中的重要作用

本研究MeRIP-seq技術(shù)不僅幫助確定了SLC7A11 mRNA上的m6A修飾位點(diǎn)，還揭示了METTL3對(duì)SLC7A11 mRNA穩(wěn)定性的調(diào)控機(jī)制。這一發(fā)現(xiàn)為理解RA的發(fā)病機(jī)制提供了新的視角，并為開發(fā)新的治療策略提供了潛在的靶點(diǎn)。未來類似的研究可以利用MeRIP-seq技術(shù)深入探索m6A修飾在其他疾病中的作用，特別是在自身免疫性疾病和癌癥中。

參考文獻(xiàn)：

Xu Y, Liu W, Zai Z, Qian X, Hu W, Peng X, Chen F. METTL3 increases ferroptosis resistance to facilitate the tumor-like features of rheumatoid arthritis synovial fibroblasts through enhancing SLC7A11 mRNA stability in an m6A-IGF2BP2-dependent manner. Int J Biol Macromol. 2025 Jul 5:145698. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2025.145698.